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ELISA酶聯(lián)免疫實驗易錯問題有哪些

更新時間:2025-05-06      瀏覽次數(shù):314
一、為什么必須設置復孔?
為獲得更準確的實驗結果,強烈建議標準品及樣本進行復孔檢測,因為復孔檢測可以:計算平均值,確保實驗結果更準確;解決實驗中誤操作造成的跳孔現(xiàn)象;計算CV值,對實驗的操作和試劑盒的精密度進行評估。

二、重復性差怎么辦?
1.樣品數(shù)量不一,加樣時間長短不一。
2.酶標儀濾光片不對或輸入波長不對。
3.酶標儀測定重復性差。

三、為什么標準曲線線性較差?
需要按照推薦方式保存標準品;溶解標準品之前需短暫離心,收集粉末;確保標準品溶解和混勻,然后再進行后續(xù)的系列稀釋步驟,確保每一步都充分混勻且移液;顯色的恰當終止;選擇合適的數(shù)學擬合方程繪制標準曲線。

四、為什么所有試劑和檢測樣本要平衡至室溫后再進行加樣操作?
溫度是ELISA結合反應的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應,實驗前務必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測樣本。避免因溫度的動力學反應差異而導致ELISA檢測結果的不準確。
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